廣州美基生物科技有限公司
100~250ml菌液，高達(dá)100~1500μg低內(nèi)毒素的質(zhì)粒DNA
| 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
| P1156-02 | HiPure Plasmid EF Maxi Kit | 10次 | 750 |
| P1156-03 | HiPure Plasmid EF Maxi Kit | 50次 | 3500 |
| P1156-02B | HiPure Plasmid EF Maxi Kit（增強(qiáng)版） | 10次 | 735 |
| P1156-03B | HiPure Plasmid EF Maxi Kit（增強(qiáng)版） | 50次 | 3500 |
| 產(chǎn)品簡介 | 實(shí)驗(yàn)流程 |
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本產(chǎn)品適合于從100~250ml細(xì)菌培養(yǎng)液中提取100~1500μg低內(nèi)毒素的質(zhì)粒DNA。產(chǎn)品采用獨(dú)特的溶液體系，可處理各種質(zhì)粒載體，包括常規(guī)高低中拷貝數(shù)的載體、大型載體，如BAC，Cosmid，P1等。DNA產(chǎn)量取決于載體拷貝數(shù)和菌液量。純化的質(zhì)粒內(nèi)毒素含量低于0.1EU/μg，可直接用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染，動(dòng)物注射等。
P1156&P1156B與競品相似，都是醇類介導(dǎo)的純化方式。菌體經(jīng)堿裂解酸中和后制備出上清液，可選的Triton X114雙水相萃取步驟可進(jìn)一步去除內(nèi)毒素，然后加入異丙醇或乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件過柱進(jìn)行純化，得到的質(zhì)?？梢詽M足大部分的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。本產(chǎn)品操作簡單和純度高，但醇類介導(dǎo)特殊性不強(qiáng)，得到質(zhì)粒DNA常受到RNA污染，造成OD濃度與電泳亮度不相符合，OD濃度虛高，特別是中低拷貝載體優(yōu)為明顯，得到的質(zhì)粒再用異丙醇沉淀可去除RNA污染，讓OD濃度更為真實(shí)。 |
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| 提取流程 | |
本試劑盒采用玻纖濾膜純化技術(shù)，只需進(jìn)行簡單的結(jié)合-洗滌-洗脫的步驟。細(xì)菌經(jīng)離心收集后，首先用堿裂法進(jìn)行裂解中和，并通過離心去除蛋白質(zhì)和基因組；上清液再經(jīng)過帶濾膜的注射器去除雜質(zhì)和內(nèi)毒素，然后將澄清的裂解物加到純化柱中進(jìn)行離心或抽濾，質(zhì)粒DNA吸附在玻纖膜上；雜質(zhì)經(jīng)過兩次清洗被去除，最后用少量洗脫液或水洗脫出純化的DNA。 |
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| 產(chǎn)品特性與優(yōu)點(diǎn) | |
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| 產(chǎn)品參數(shù) | |
| 主要功能 | 從100~250ml細(xì)菌培養(yǎng)液中提取100~1500μg低內(nèi)毒素的質(zhì)粒DNA |
| 純化產(chǎn)物 | 質(zhì)粒DNA |
| 下游應(yīng)用 | 細(xì)胞轉(zhuǎn)染，動(dòng)物注射等 |
| 純化方式 | 大柱高速離心型 |
| 純化技術(shù) | 玻纖濾膜純化柱 |
| 操作方法 | 離心操作 |
| 樣品類型 | 常規(guī)高低中拷貝數(shù)的載體、大型載體 |
| 樣品用量 | 高拷貝數(shù)載體：100-150ml培養(yǎng)液；低拷貝數(shù)載體：150-250ml培養(yǎng)液 |
| 核酸產(chǎn)量 | 100~1500μg |
| 最少洗脫體積 | 0.7ml |
| 操作時(shí)間 | 不超過60分鐘 |
| 柱子每次載液體積 | 20ml |
| 柱子最大核酸載量 | 1mg |
| 下載資源 |
| 說明書 |
| 性能驗(yàn)證報(bào)告 |
| 異丙醇沉淀質(zhì)粒去除RNA污染的方法 |
